Ход определения
Ингредиенты (мл)
Проба
Контрольный раствор
Субстратный раствор АсАТ
0,5
0,5
Физиологический раствор
-
0,1
Предварительно инкубируют в течении 3 мин при 37°С
Сыворотка крови
0,1
-
Перемешивают, инкубируют точно 60 мин при 37°С
2,4 - ДНФГ
0,5
0,5
Перемешивают и оставляют стоять 20 мин при температуре (от + 15°С до +25°С)
0,4н NaOH
5,0
5,0
Перемешивают, выдерживают 10 минут при комнатной температуре. Колориметрируют при длине волны 530 нм в кювете 1х1 мм, против холостой пробы.
Калибровка
В обозначенные пробирки вносят пипеткой отдельные растворы в вышеприведенном порядке. После добавления реактива 2 содержимое пробирок перемешивают и через 20 мин добавляют раствор NaOH. Через 10 мин измеряют оптическую плотность раствора №2-5 против раствора №1. строят калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации.
Раствор №
Физиологический раствор (мл)
Реактив 4 (мл)
Реактив 1 (мл)
Реактив 2 (мл)
Раствор NaOH
Конечная кат. конц. (мккат/л)
1
0,10
0,50
-
0,50
5,00
0
2
0,10
0,45
0,05
0,50
5,00
0,28
3
0,10
0,40
0,10
0,50
5,00
0,56
4
0,10
0,35
0,15
0,50
5,00
0,83
5
0,10
0,30
0,20
0,50
5,00
1,11 Перейти на страницу: 1 2 3 4 5 6 7 8 9